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ELISA常見類型的分類及原理特點
以下是ELISA常見類型的分類及原理特點,本生結(jié)合高可信度來源整理:
一、ELISA四大核心類型?
直接ELISA?
原理?:抗原直接包被于固相載體,酶標(biāo)一抗直接檢測抗原?。
特點?:步驟簡單(無需二抗),但靈敏度較低(信號未放大),背景較高?。
應(yīng)用?:病毒顆粒檢測(如HPV)、純化蛋白定量?。
間接ELISA?
原理?:抗原包被后,先加一抗,再用酶標(biāo)二抗檢測一抗?。
特點?:信號放大5-10倍,靈敏度高;但可能因二抗交叉反應(yīng)增加背景?。
應(yīng)用?:HIV抗體篩查、自身免疫病檢測(如ANA)?。
夾心ELISA?
原理?:雙抗體夾心結(jié)構(gòu)(捕獲抗體+檢測抗體),形成“三明治"復(fù)合物?。
特點?:靈敏度高(pg/mL級),需抗原具雙表位(大分子蛋白)?。
應(yīng)用?:細(xì)胞因子(IL-6)、腫瘤標(biāo)志物(CEA)檢測?。
競爭ELISA?
原理?:樣本抗原與標(biāo)記抗原競爭結(jié)合有限抗體,信號強度與樣本濃度成反比?。
特點?:適用于小分子(如激素、藥物),但靈敏度較低?。
應(yīng)用?:皮質(zhì)醇檢測、農(nóng)藥殘留分析?。
二、類型對比與選擇建議?
類型? ?靈敏度? ?適用分子? ?優(yōu)勢? ?局限性?
直接ELISA 低 大分子抗原 操作快速,無交叉反應(yīng) 背景高,需標(biāo)記多種一抗
間接ELISA 高 抗體/抗原 信號放大,經(jīng)濟靈活 步驟多,可能交叉反應(yīng)
夾心ELISA 多表位大分子 高特異性,適合復(fù)雜樣本 需雙抗體,成本較高
競爭ELISA 中 小分子 可檢測不純樣品,數(shù)據(jù)再現(xiàn)性好 靈敏度低,顯色與濃度負(fù)相關(guān)
三、視頻演示?
四、衍生類型與特殊設(shè)計?
雙抗原夾心法?:用于抗體檢測(如hCG妊娠檢測)?。
FastScan™ ELISA?:基于溶液的夾心法,縮短檢測時間?。
選擇時需根據(jù)目標(biāo)分子大小、樣本復(fù)雜度及靈敏度需求綜合判斷?。
注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產(chǎn)品說明請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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